体内時計の応用と限界 - 徐州ジムオロロジ有限公司

Scientific Reports volume 13、記事番号: 6093 (2023) この記事を引用

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1 オルトメトリック

メトリクスの詳細

死亡時刻の推定は法医学において最も重要な問題の 1 つです。ここでは、開発された体内時計に基づく手法の適用性、限界、信頼性を評価しました。私たちは、死亡時刻が特定された 318 個の死亡心臓における時計遺伝子 BMAL1 および NR1D1 の発現をリアルタイム RT-PCR により分析しました。死亡時刻を推定するために、朝と夕方の死亡のそれぞれNR1D1/BMAL1比とBMAL1/NR1D1比という2つのパラメータを選択しました。 NR1D1/BMAL1 比は朝の死亡で有意に高く、BMAL1/NR1D1 比は夕方の死亡で有意に高かった。性別、年齢、死後の間隔、およびほとんどの死因は、乳児と高齢者、および重度の脳損傷を除いて、この 2 つのパラメーターに大きな影響を与えませんでした。私たちの方法はすべての場合に機能するとは限りませんが、死体が置かれた環境に強く影響される古典的な方法を補完するという点で、法医学の実践に役立ちます。ただし、この方法は乳児、高齢者、重度の脳損傷のある患者には注意して適用する必要があります。

死亡時刻の推定は、多くの場合非常に困難ですが、法医学の実践において最も重要なタスクの 1 つです。現在までに、死亡時刻を推定するための多数の方法が開発されています1,2。過去 10 年間にわたり、組織ナノメカニクス 3、質量分析ベースの定量的プロテオミクス 4、口腔微生物叢群集の分析 5、マイクロ RNA 分析 6 などのさまざまな革新的な技術が死後間隔を推定するために導入され、この分野に大きな進歩をもたらしました。しかし、これらの方法のほとんどは死亡からの時間を推定しますが、死亡時刻は推定しません。死亡時刻を推定する現在の方法は依然として満足のいくものではありません。

時間生物学の進歩は、時間薬理学、時間療法、睡眠障害治療などのさまざまな医療分野に大きな影響と進歩をもたらしました7、8、9、10、11、12、13、14。時間生物学は、特に死亡時刻の推定において法医学に貢献できます。ただし、時間生物学の法医学への応用は非常に限られています。私たちの知る限り、時間生物学を法医学捜査に応用した報告は現在 1 件のみで、松果体、血清、尿中のメラトニン濃度に基づいて死亡時刻を推定したものです 15。そこで、体内時計を死亡時刻の推定に応用することを試みました。 2011 年に、我々はマウスモデルを使用した死亡時刻の推定における時間生物学の最初の法医学的応用を報告し、その方法をいくつかの解剖症例に適用しました 16。我々の以前の報告では、概日時計システムにおいて、脳および筋肉のアリール炭化水素受容体核移行因子様1（BMAL1またはARNTL）と核受容体サブファミリー1のグループDメンバー1（Rev-Erbα、NR1D1）という2つの主要な振動子遺伝子を使用しました。腎臓、肝臓、心臓の体内時計を読み取る。これら 2 つの時計遺伝子は逆位相で振動する 17,18 ため、NR1D1/BMAL1 比は各遺伝子発現の概日振動を増幅します 16。私たちは、法医学実践における私たちの方法の適用可能性を実証しましたが、限られた数の解剖症例のみが検査されたため、この方法の信頼性と限界を明らかにすることはできませんでした。

その開発以来、私たちはこの方法を解剖症例における死亡時刻の推定という日常的な業務に適用してきました。この研究では、私たちの部門で死亡時刻が判明している 318 件の解剖症例に適用した結果に基づいて、私たちの方法を評価しました。体内時計に基づいて死亡時刻を推定する私たちの方法の実際的な適用可能性と限界を示します。

NR1D1/BMAL1 (N/B) および BMAL1/NR1D1 (B/N) 比を死亡時間に対してプロットしたところ、それぞれ 6:00 および 18:00 付近に明確なピークが得られました (図 1a および b)。時計遺伝子の発現は死体でも正確に検出できるということです。

剖検症例における N/B および B/N 比の時間的パターン。 N/B (a) および B/N (b) 比を死亡時間に対してプロットしました。解剖症例を 4 つの時間領域に分割し、各時間領域における N/B (c) および B/N (d) 比を多重比較検定により調べました。 **p < 0.01、3:00 ～ 8:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。 ##p < 0.01、15:00 ～ 20:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。

図 1c および d は、4 つの時間領域（朝、3:00 ～ 8:59、正午、9:00 ～ 14:59、夕方、15:00）における N/B および B/N 比の平均値を示しています。 -20:59と夜、21:00〜2:59）。 N/B および B/N 比は、それぞれ他の時間領域よりも朝と夕方で有意に高く、これらの比が死亡時刻を推定するのに適切なパラメーターであることが確認されています。しかし、一部の剖検例では、朝と夕方にN/B比とB/N比がそれぞれ非常に低い値を示しました（図1aとb）。これは、いくつかの要因がこれらのパラメータに影響を与えていることを示唆しています。

次に、死亡者の割合に影響を与える要因を検討しました。まず、比率の時間的パターンにおける性差を調べました (男性、n = 224、女性、n = 94)。どちらの性別も、N/B (図 2a) および B/N (図 2b) 比の同様の時間的パターンを示しました。死亡した男性のN/B（図2c）およびB/N（図2d）比は、それぞれ朝と夕方に有意に高く、これは全症例の結果と同様でした（図1cおよびd）。一方、死亡した女性のN/B比（図2c）は午前中に有意に高かったが、これは死亡した男性の結果と同様であるが、B/N比は他の時間帯よりも夕方の方が高かった。しかし、その差は統計的に有意ではありませんでした。 (図2d)。

故人の心臓のN/B (a) およびB/N (b) 比に対する性別の影響の評価。男性 (黒丸、n = 224) と女性 (白丸、n = 94) の N/B および B/N 比を死亡時刻に対してプロットしました。 4 時間ドメインの N/B (c) および B/N (d) 比を、男性 (黒柱) と女性 (白抜き柱) で多重比較検定によって調べました。 **p < 0.01、3:00 ～ 8:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。 ##p < 0.01、15:00 ～ 20:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。

症例を3つの年齢グループに分けました（19歳以下、n = 13、20～69歳、n = 200、70歳以上、n = 105）。すべての年齢層が同様の時間的パターンを示しました（図3a〜d）。午前中のN/B比は、20〜69歳および70歳以上のグループの他の3つの時間領域よりも有意に高かった（図3c）。夕方のB/N比は、20〜69歳のグループでのみ他の3つの時間領域よりも高かった（図3d）。対照的に、朝（3:00～8:59）の N/B 比の時間的パターンと夕方（15:00～20:59）の B/N 比の時間的パターンは、それらと有意な差異はありませんでした。 19 歳以下のグループの他の時間領域では (図 3c および d)。朝のN/B比と夕方のB/N比を年齢に対してプロットしました。結果は、N / BおよびB / N比が年齢に依存しないことを示しました（図3eおよびf）。しかし、若年層と高年齢層の症例数は少なかった。したがって、これらのグループの統計分析には、より多くのケースを使用する必要があります。

故人の心臓のN/B (a) およびB/N (b) 比に対する年齢の影響の評価。解剖症例は、19 歳以下 (黒丸、n = 13)、20 ～ 69 歳 (白丸、n = 200)、および 70 歳以上 (灰色の丸、n = 105) の 3 つの年齢グループに分類されました。 4 時間領域の N/B (c) および B/N (d) 比は、19 歳以下 (黒の柱)、20 ～ 69 歳 (白抜きの柱)、および 70 歳以上 (灰色の柱) のグループで調べられました。複数の比較テストによる。 3:00 ～ 8:59 の時間領域での N/B 比 (e) と 15:00 ～ 20:59 の時間領域での B/N 比 (f) を年齢に対してプロットしました。 **p < 0.01、3:00 ～ 8:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。 ##p < 0.01、15:00 ～ 20:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。

最後に、死後の間隔が比率に及ぼす影響を調べました。症例を死後間隔が 30 時間未満 (n = 250) と死後間隔が 30 時間超 (n = 68) の 2 つのグループに分けました。両方のグループのN/B比とB/N比は、それぞれ朝と夕方にピークを示し、死後の間隔がそれらに実質的に影響を及ぼさないことを示しました（図4a〜f）。ただし、死後間隔が30時間を超えるグループでは、夕方と正午の時間領域の間にB / N比に有意な差はありませんでした（図4d）。これは、死後間隔が 30 時間を超えるグループの正午の時間領域では症例数が少ない (n = 9) ためと考えられます。朝のN/B比と夕方のB/N比を死後間隔に対してプロットしました。結果は、比率が死後の間隔に依存しないことを示しました（図4eおよびf）。

死亡者の心臓のN/B (a) およびB/N (b) 比に対する死後間隔の影響の評価。剖検症例は、死後間隔が 30 時間未満 (黒丸、n = 250) と 30 時間超 (白丸、n = 68) の 2 つのグループに分けられました。 4 時間ドメインの N/B (c) および B/N (d) 比は、死後間隔が 30 時間未満 (黒柱) および 30 時間超 (白柱) のグループで多重比較検定によって調べられました。 3:00〜8:59の時間領域(e)のN/B比と15:00〜20:59の時間領域(f)のB/N比を死後間隔に対してプロットしました。 **p < 0.01、3:00 ～ 8:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。 ##p < 0.01、15:00 ～ 20:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。

次に、内因性死亡群（n = 73）と外因性死亡群（n = 245）の間のN/BおよびB/N比の時間的パターンの違いを調べました。図 5a と b に示すように、グループ間に有意差はありませんでした。外因性死亡の場合、朝のN/B比と夕方のB/N比は、他の時間領域よりも有意に高かった（図5cおよびd）。ただし、内因性死亡の場合、朝のN/B比は他の時間領域よりも有意に高かったが、夕方のB/N比は他の時間領域と大きく変わらなかった（図5cおよび図5c）。 d)。また、特定の死因が比率に与える影響も調べました。脳損傷を除く、出血性ショックおよび外傷性ショック、大動脈破裂、溺死、火傷、窒息、中毒、虚血性心不全などの最も一般的な死因（表1）は、比率に有意な影響を与えていないようです（データ）図示されていない）。

死亡者の心臓のN/B (a) およびB/N (b) 比に対する死因の影響の評価。解剖症例は、内因性死（黒丸、n = 73）と外因性死（白丸、n = 245）の 2 つのグループに分けられました。 4 時間ドメインの N/B (c) および B/N (d) 比を、内因性死 (黒柱) および外因性死 (白柱) グループで多重比較検定によって調べました。 **p < 0.01、3:00 ～ 8:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。 ##p < 0.01、15:00 ～ 20:59 の時間ドメインと他の時間ドメインの比較。

注目すべきことに、脳損傷、特に脳浮腫、脳ヘルニア、脳低酸素症を伴う慢性脳損傷は、死亡者の心臓の比率に強く影響を与えるようでした。図6aおよびbに示すように、慢性脳損傷による晩発死亡の場合（n = 15）、N/B比の朝のピークとB/N比の夕方のピークは発生しませんでしたが、 N/B および B/N 比のピークは、重度の脳損傷を伴う急性死亡例で観察されました (n = 35)。慢性脳損傷による晩期死亡の症例では、N/B比およびB/N比の変動は見られませんでした（図6cおよびd）。重度の脳損傷を伴う急性死亡の場合、朝のN/B比は夕方のN/B比とは大きく異なります（図6c）。ただし、これらの所見は限られた少数の症例からのものであり、慢性脳損傷によるN/BおよびB/N比の振動の喪失は、より多くの症例で確認される必要があります。

死亡者の心臓のN/B (a) およびB/N (b) 比に対する重度の脳損傷の影響の評価。重度の脳損傷症例は、急性脳損傷による即時死亡の症例（黒丸、n = 35）と、脳浮腫、脳ヘルニア、または脳低酸素症を伴う慢性脳損傷による長期死亡の症例（白丸、 n = 15)。急性脳損傷による即死群（黒柱）と慢性脳損傷による長期死亡群（白柱）の4つの時間領域におけるN/B（c）およびB/N（d）比を多重比較検定により調べた。。 **p < 0.01、3:00 ～ 8:59 の時間ドメインと 15:00 ～ 20:59 の時間ドメイン。 $p < 0.05、急性脳損傷による即時死亡と慢性脳損傷による長期死亡。

私たちの方法は、故人の体内時計を読み取ります。ただし、時計には 2 つの時間領域 (朝、6 時頃、夕方、18 時頃) しかありません。 N/B比は6時の読書に適しており、B/N比は18時の読書に適しています。 N/B 比が 25 を超えるすべてのケースは 1:00 から 10:00 までに発生した死亡 (n = 40)、比が 40 を超えるケースは 3:00 から 9:00 までに発生した死亡 (n = 40) 23) (図 7a)。一方、B/N 比が > 1.5 のすべての症例は 14:00 から 22:00 までに発生した死亡であり (n = 39)、比が > 4 の症例は 15:00 から 20:00 までに発生した死亡でした。 :00 (n = 11) (図 7b)。しかし、我々の方法で予測されたのは朝夕の死亡の24.8%（318人中79人）だけであり、N/BおよびB/N比の値が低いからといって朝夕の死亡が除外されるわけではありません。したがって、この方法はすべての場合に有効であるわけではありませんが、従来の方法をまったく異なる観点から補完するものであるため、法医学の実践においては依然として重要です。

私たちの手法を法医学実践に適用するための基準。故人の心臓におけるN/B比の時間的パターン。 (a) N/B 比 > 25 (赤線) の死亡時刻は 1:00 から 10:00 の間 (n = 40)、N/B 比 > 40 (青線) の症例の死亡時刻は3:00 から 9:00 の間 (n = 23)。故人の心の中のB/N比の時間的パターン。 (b) B/N 比 > 1.5 の症例 (赤線) の死亡時刻は 14:00 から 22:00 の間 (n = 39)、比 > 4 (青線) の症例の死亡時刻は15:00 から 20:00 の間 (n = 11)。

現在まで、死亡時刻を推定するほとんどの方法は死後の時間を推定しており、内部、外部、生前、死後の状況の影響を受けます。私たちは、死亡時に体内時計が停止するという仮説を立て、この停止した体内時計を読み取る手法を開発しました16。したがって、私たちの方法は死亡からの時間ではなく死亡時間を推定し、環境要因から独立しているように見えます。ただし、故人の年齢、性別、死因、ライフスタイルなどの内的要因の影響を受ける可能性があります。新しく開発された手法の信頼性と実際の適用の限界を評価する必要があります。したがって、我々は、死亡時刻が定められている症例数を増加させて、我々の方法を検証した。 N/B 比は 6:00 付近にピークを示し、この方法が安定した結果を得ることができることを示しています。さらに、18:00 付近にピークを示す新しい逆パラメータである B/N 比を調べました。朝はN/B比が高く、夕方はB/N比が高かった。したがって、この方法を使用すると、死亡が朝に起こったか夕方に起こったかを判断できます。しかし、低い N/B 値と B/N 値は、それぞれ 6 時頃と 18 時頃の死亡例で見られることが多かった。マウスは均一な遺伝的背景を持ち、厳密に管理された環境で飼育されていたため、このような不規則な値は動物実験では見られませんでした16。さらに、すべてのマウスは深い麻酔下で頚椎脱臼により迅速に屠殺された。一方、人間は異なる遺伝的背景を持ち、さまざまな時間パターンで生活しているため（シフト勤務など）、それが体内時計遺伝子の発現パターンに影響を与える可能性があります19,20。

本研究では、性別、年齢、死後間隔（死後96時間以内）がN/BおよびB/N比に有意な影響を与えないことを実証した。ただし、最年少（< 1 歳、n = 5）および最高齢（> 90 歳、n = 14）の症例、および死後の間隔が長い症例（> 48 時間、n = 11）は、限られた範囲で検査されました。番号。体温や夜間入眠などの概日リズムは生後 60 日以内に現れることが知られています 21。さらに、SNC（視交叉上核）および一部の周辺組織における時計遺伝子発現の概日振動がヒト以外の霊長類の胎児でも確認されており 21 、これはヒト乳児の心臓における時計遺伝子発現も概日振動を示す可能性を示唆している。したがって、体内時計に基づく死亡時刻の推定は乳児の場合にも適用できると考えられる。しかし、母親のメラトニンはヒト以外の霊長類の胎児の時計遺伝子発現に影響を及ぼし22、母乳育児パターンが乳児の概日時計に影響を与える可能性があることを示しています。したがって、乳児の心臓と成人の心臓の間の時計遺伝子の発現パターンの違いは、将来の研究で判明する可能性があります。一方で、加齢はヒトの前頭前野における遺伝子発現の概日パターンに大きな影響を与え、老年期の概日リズムに変化をもたらす可能性があることが報告されています23。高齢者におけるさまざまな概日リズム、特に摂食パターンは、体内時計遺伝子の発現に影響を与える可能性があります19,20。末梢組織の体内時計もアドレナリン作動性の制御下にあるため 24、ベータアドレナリン作動性ニューロエフェクターシステムの加齢に伴う変化は、高齢者の心臓における時計遺伝子の発現パターンを変化させる可能性があります 25。上記の事実に基づいて、私たちの方法は幼児と高齢者に慎重に適用される必要があります。死後の間隔が長くなると RNA の劣化が生じる可能性があり 26、結果の不確実性が高まります。小児、高齢者、死後間隔が長い症例の症例数は少ないため、統計的に意味のある議論をするには、症例数を増やした研究が必要です。

死因はN/BおよびB/N比に影響を与えているようです。ただし、内因性死亡例と外因性死亡例の間の時間的パターンに有意な差はありませんでした。さらに、ほとんどの死因は比率に大きな影響を与えませんでした。例外的に、脳浮腫、脳ヘルニア、または脳低酸素症で死亡した場合には、両方の比のピークがほとんど消失しました。また、慢性脳損傷症例の腸腰筋組織におけるN/B比の変化も発見しました（図示せず）。これは、慢性脳損傷誘発性SCN損傷が末梢時計遺伝子発現の全身的な変化を引き起こすことを示唆しています。脳外傷による概日リズムの乱れが報告されています27、28、29。最近、外傷性脳損傷によるSCNおよび海馬の時計遺伝子発現の変化がラットモデルで報告されました30。水中毒のマウスモデルにおける我々の予備的な結果は、脳浮腫が心臓の体内時計の変化を誘発することを示した（補足データ）。したがって、体内時計に基づく死亡時刻の推定は、重度の脳損傷や、重度の肝性脳症などの脳機能に影響を与える疾患による内因性死亡の場合には、慎重に適用する必要があります。

本研究では 318 例を分析した。しかし、性別、年齢、死因などの要素に関して症例数には偏りがあった。女性など一部のグループの症例数は 100 件未満であり、これらの症例の一部は、朝と夕方の時間領域と他の時間領域との間の N/B および B/N 比において統計的有意性を示さなかった。したがって、私たちの方法は、より多くの症例を使用した研究でさらに検証される必要があります。十分な数の症例を分析するには、複数の施設での研究が必要な場合があります。

最近、Cyclops と呼ばれる循環順序付けアルゴリズムを使用した人間の転写リズムの分析が報告されました 31。 Cyclops アルゴリズムは、時間情報が不足しているハイスループットデータからサンプルの概日位相を推定することを可能にし、法医学実践における死亡時刻を推定する革新的なアプローチとなることが期待されています。 Cyclops は人口ベースの人体臓器データを一時的に再構成するアルゴリズムであるため、法医学実践における個々の解剖サンプルの死亡時刻を推定する方法としての有用性は不明です。サイクロプスの有用性と問題点は、科学捜査現場で検証することで明らかになります。もう 1 つの問題は、現在、フォレンジックにとってハイスループット分析は高価であることです。

今回の研究では、我々の方法で朝または夕方の死亡を予測できたのは、合計 318 件のうち 79 件 (約 25%) のみでした。これは、私たちの方法が限られた場合にのみ機能することを示しています。しかし、死亡時刻を推定するための古典的な方法はすべて不確実性があり、死亡時に始まり、さまざまな環境要因の影響を受ける死後の変化に基づいています。対照的に、私たちの方法は概日時計に基づいて死亡時間を直接推定します。概日時計は死亡時に停止し、死後の変化に影響を与える要因の影響を受けません。たとえば、亡くなった人の体温が周囲温度に達した後、体温に基づいて死亡からの時間を推定することは困難です。熱傷死亡の場合、体温、角膜混濁、死後硬直などの多くの古典的な推定方法は使用できません。したがって、すべての古典的な推定方法には、その適用性に制限があります。当社の手法は、従来の手法を全く別の観点から補完するものであり、従来の手法が適用できない箇所でも使用可能です。

結論として、私たちの方法は、性別、年齢、死後の間隔、死因に関係なく、故人の心臓のN/BおよびB/N比を読み取ることによって、朝と夕方の死亡を推定することを可能にします。 N/B および B/N 比は、朝または夕方に死亡が発生する可能性を排除することはできませんが、私たちの方法は、死後の変化に依存する古典的な方法を補完できるため、法医学の実践において依然として価値があります。ただし、重度の脳損傷は末梢の概日時計に大きな影響を与えるため、私たちの方法は重度の脳損傷の場合には適用できない可能性があります。さらに、この方法の乳児や高齢者への適用可能性については、より多くのケースで評価する必要があります。

心臓サンプルは、死亡時刻が判明している法医解剖症例 318 例 (男性 224 例、女性 94 例) から採取されました。剖検対象の年齢は 2 か月から 97 歳（平均 58.7 歳）の範囲であり、すべての症例の死後間隔は 96 時間未満（平均 22.3 時間）でした。被験者の死因は表 1 に示されています。組織サンプルは解剖中に採取され、液体窒素で直ちに凍結され、使用するまで -80 °C で保存されました。時計遺伝子の発現は、死亡時刻を推定するプロセスの一環として、当研究所のすべての解剖症例で日常的に分析されています。

全RNAを組織サンプル(約100 mg)から抽出し、メーカーの指示に従ってMaxwell RSC SimplyRNA組織キット(Promega Corporation、ウィスコンシン州マディソン)を備えたMaxwell Systemに適用した。次に、6 つのランダムプライマー (TAKARA BIO INC.) を備えた PrimeScript RT 試薬キット (TAKARA BIO INC.、大津、日本) を使用して、1 μg の全 RNA を cDNA に逆転写しました。その後、SYBR® Premix Ex Taq™ II キット (タカラバイオ株式会社) と特定のプライマーセットを使用して、生成された cDNA を qPCR 解析に供しました (表 2)。 mRNAの増幅と検出は、Thermal Cycle Dice® Real Time System (TP800、タカラバイオ株式会社)を用いて行いました。

データは、平均値±平均値の標準誤差として表されました。対応のないスチューデント t 検定とシェッフェの F 検定をそれぞれ 2 つのグループ間の値を比較するため、および多重比較のために実行しました。統計的有意性は p < 0.05 に設定されました。

私たちの研究は、和歌山県立医科大学研究倫理委員会の承認（第3177号）を受けました。すべての手順はヘルシンキ宣言の原則に従って実行されました。さらに、この研究は過去の解剖記録と心臓組織を使用して実施されました。記録と心臓組織の使用について遺族からインフォームドコンセントを得ることができませんでした。「人を対象とした医学研究に関する倫理指針（厚生労働省制定）」に準拠し、 12-1 (2) (a) (c) に基づき、和歌山県立医科大学の研究倫理委員会の審査委員会は、これが保存された解剖の匿名化された遡及的研究であったため、研究対象となった個人の親族からの書面によるインフォームドコンセントの必要性を放棄した。 -由来組織。

著者は、要求に応じてすべてのデータを入手できることを宣言します。すべてのリクエストは近藤敏和博士に行ってください。

Henssge, C. & Madea, B. 死後初期の死後の経過時間の推定。法医学。内部。 144(2-3)、167-175。 https://doi.org/10.1016/j.forsciint.2004.04.051 (2004)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

マデア、B. 死亡時刻の推定。第 3 版 (CRC Press、ロンドン、2015)。 https://doi.org/10.1201/b19276

De-Giorgio、F. et al. 組織ナノメカニクスに基づいた死後間隔を推定するための新しい方法。内部。 J.レッグ医学。 133(4)、1133–1139。 https://doi.org/10.1007/s00414-019-02034-z (2019)。

記事 Google Scholar

Choi、KMら。法医学的な PMI 推定のためのバイオマーカーを発見するための死後プロテオミクス。内部。 J.レッグ医学。 133(3)、899–908。 https://doi.org/10.1007/s00414-019-02011-6 (2019)。

記事 Google Scholar

Dong, K. et al. 死後の間隔を推定するツールとしての口腔微生物叢コミュニティの継承。科学。議員9(1)、13063。https://doi.org/10.1038/s41598-019-49338-z (2019)。

論文 ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

タオ、L.ら。ラット心臓組織における Cdc25b mRNA に基づく早期死後間隔の推定。脚。医学。（東京）35、18～24。 https://doi.org/10.1016/j.legalmed.2018.09.004 (2018)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Baiardi, S. et al. 周産期うつ病における時間生物学、睡眠関連危険因子、光療法：「Life-ON」プロジェクト。 BMC 精神医学 16、374 (2016)。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

ゴー、A.ら。 LC-MS/MS を使用した死後間隔 (PMI) の推定のための硝子体液中のヒポキサンチンおよび乳酸レベルの分析。法医学。内部。 299、135–141。 https://doi.org/10.1016/j.forsciint.2019.03.024 (2019)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

ホワイト、WB、アンダース、R.J、マッキンタイア、JM、ブラック、HR、シカ、DA、ベラパミル研究グループ。全身性高血圧に対するベラパミルの新規送達システムの夜間投与。午前。Ｊ．カーディオール． 76:375–80 (1995)。

ホワイト、WB、メロトラ、DV、ブラック、HR & ファコウヒ、TD 夜間血圧に対する持続放出制御ベラパミルの効果（ディッパー対非ディッパー）。 COER-ベラパミル研究グループ。午前。Ｊ．カーディオール． 80、469–474 (1997)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Dallmann, R.、Brown, SA & Gachon, F. 時間薬理学: 新しい洞察と治療への影響。アンヌ。ファーマコル牧師。有毒。 54、339–361 (2014)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Barion, A. & Zee, PC 概日リズム睡眠障害に対する臨床的アプローチ。スリープメッド。 8、566–577 (2007)。

記事 PubMed PubMed Central Google Scholar

ローゼンタール、ネブラスカ州他。睡眠相遅延症候群の治療としての明るい朝の光の位相シフト効果。睡眠 13、354–361 (1990)。

CAS PubMed Google Scholar

Cuesta, M.、Boudreau, P.、Cermakian, N. & Boivin, DB 模擬夜勤勤務中の光線療法による人間の周辺時計の急速なリセット。科学。議員 7(1)、16310。https://doi.org/10.1038/s41598-017-16429-8 (2017)。

論文 ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

三上宏ほか死体中のメラトニンの定量による死亡時刻の推定。内部。 J.レッグ医学。 107、42–51 (1994)。

記事 CAS Google Scholar

木村明、石田泰、林達也、野坂正樹、近藤哲也体内時計に基づく死亡時刻の推定。内部。 J. Legal Med. 125(3)、385–391。 https://doi.org/10.1007/s00414-010-0527-4 (2011)。

論文 PubMed Google Scholar

Storch、KF et al. 肝臓と心臓における広範かつ多岐にわたる概日遺伝子発現。 Nature 417(6884)、78–83。 https://doi.org/10.1038/nature744 (2002)。

論文 ADS CAS PubMed Google Scholar

レパート、SM & ウィーバー、DR 哺乳類における概日タイミングの調整。ネイチャー 418(6901)、935–941。 https://doi.org/10.1038/nature00965 (2002)。

論文 ADS CAS PubMed Google Scholar

Arendt, J. 交代勤務: 体内時計に対処する。占領する。医学。 (ロンド) 60(1)、10-20。 https://doi.org/10.1093/occmed/kqp162 (2010)。

論文 PubMed Google Scholar

黒田博ほか食事の頻度パターンは、マウスの末梢概日時計の位相を決定します。科学。議員 2、711。https://doi.org/10.1038/srep00711 (2012)。

論文 CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

McGraw, K.、Hoffmann, R.、Harker, C. & Herman, JH 人間の乳児における概日リズムの発達。睡眠 22(3)、303 ～ 310。 https://doi.org/10.1093/sleep/22.3.303 (1999)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Torres-Farfan, C. et al. 母親のメラトニンは非ヒト霊長類の胎児の時計遺伝子発現に影響を与える。内分泌学 147(10)、4618–4626。 https://doi.org/10.1210/en.2006-0628 (2006)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

チェン、CY 他人間の前頭前野における遺伝子発現の概日パターンに対する老化の影響。手順国立アカド。科学。米国 113(1)、206–211。 https://doi.org/10.1073/pnas.1508249112 (2016)。

論文 ADS CAS PubMed Google Scholar

寺園博ほかマウス肝臓における時計遺伝子発現のアドレナリン作動性調節。手順国立アカド。科学。米国 100(11)、6795–6800。 https://doi.org/10.1073/pnas.0936797100 (2003)。

論文 ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

ホワイト、M.ら。人間の心臓におけるベータアドレナリン作動性神経エフェクターシステムの加齢に伴う変化。回覧 90(3)、1225–1238 (1994)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Inoue, H.、Kimura, A. & Tiji, T. 死んだラット体内の mRNA の分解プロファイル: 基本的な半定量研究。法医学。内部。 130(2-3)、127-132。 https://doi.org/10.1016/s0379-0738(02)00352-3 (2002)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

Duclos, C. et al. 外傷性脳損傷後の睡眠および覚醒障害。パソル。バイオル。 (パリ) 62(5)、252–261。 https://doi.org/10.1016/j.patbio.2014.05.014 (2014)。

論文 CAS PubMed Google Scholar

NA グリマ、JL ポンズフォード、マサチューセッツ州セントティレール、D. マンスフィールド & SM ラージャラトナム外傷性脳損傷後の概日メラトニンリズム。神経リハビリテーション。神経修復 30(10)、972–977。 https://doi.org/10.1177/1545968316650279 (2016)。

記事 Google Scholar

Zhanfeng, N.、Hechun, X.、Zhijun, Z.、Hongyu, X. & Zhou, F. 外傷性脳損傷患者の睡眠障害における概日時計遺伝子の制御。世界の脳神経外科。 130、e475–e486。 https://doi.org/10.1016/j.wneu.2019.06.122 (2019)。

論文 PubMed Google Scholar

ブーン、DR 他。外傷性脳損傷による概日時計の調節不全。 PLoS ONE 7(10)、e46204 (2012)。

論文 ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

Anafi、RC、Francey、LJ、Hogenesch、JB、Kim、J. CYCLOPS は、健康と病気における人間の記述リズムを明らかにします。手順国立アカド。科学。米国 114(20)、5312–5317。 https://doi.org/10.1073/pnas.1619320114 (2017)。

論文 ADS CAS PubMed PubMed Central Google Scholar

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本研究の一部は、文部科学省科学研究費補助金基盤研究（A）（助成金 25253055、近藤哲也）の支援を受けました。研究の運営管理をしていただいた川口真理子氏に心より感謝申し上げます。

〒641-8509 和歌山県紀三井寺811-1 和歌山県立医科大学法医学教室

Akihiko Kimura, Yuko Ishida, Mizuho Nosaka, Akiko Ishigami, Hiroki Yamamoto, Yumi Kuninaka & Toshikazu Kondo

和歌山県紀南病院循環器内科

Satoshi Hata

独立行政法人国立病院機構南和歌山医療センター脳神経外科

Mitsunori Ozaki

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AK は概念化、データ分析、およびデータ分析に貢献しました。通訳、原稿執筆。 TK はデータの完全性に対して責任を負い、研究の設計と原稿の執筆に貢献しました。 YI はデータを概念化し、解釈しました。 MN、AI、HY、YK、SH は解剖サンプルの分析に貢献しました。 MOは動物実験に貢献しました。著者全員が原稿をレビューしました。

Correspondence to Toshikazu Kondo.

著者らは競合する利害関係を宣言していません。

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転載と許可

木村明、石田泰、野坂正他法医学実践における死亡時刻を推定するための体内時計に基づく方法の応用と限界。 Sci Rep 13、6093 (2023)。 https://doi.org/10.1038/s41598-023-33328-3

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受信日: 2022 年 11 月 11 日

受理日: 2023 年 4 月 11 日

公開日: 2023 年 4 月 13 日

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-33328-3

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